Rekompensata Za Znak Zodiaku
Podstawa C Celebryci

Dowiedz Się Kompatybilności Za Pomocą Znaku Zodiaku

Wyjaśnienie: Dlaczego u kilku osób z objawami Covida wynik testu jest ujemny?

Wiele osób z objawami Covid-19 uzyskało wynik negatywny. Istnieje kilka prawdopodobnych przyczyn, takich jak wykrycie mutacji wirusa ucieczki, jakość pobierania próbek i testowania oraz skuteczność zestawów RT-PCR.

Testy mogą się nie udać na różnych etapach, od złego pobierania i przechowywania próbek po wadliwą ekstrakcję i amplifikację. (Ekspresowe zdjęcie: Vishal Srivastav)

Ponieważ Indie zmagają się z bezprecedensowym zapotrzebowaniem na testy RT-PCR, raporty sugerują, że nawet 20% pacjentów z objawami Covid-19 ma wynik negatywny.







Ta pozorna tendencja do fałszywie ujemnych wyników może uniemożliwić poważnym pacjentom przyjęcie do szpitala i krytyczną opiekę, jednocześnie pozwalając bezobjawowym przemieszczać się i rozprzestrzeniać wirusa. Tendencja skłoniła ekspertów, w tym dyrektora AIIMS, dr Randeepa Guleria, do zalecenia leczenia Covid-19 wszystkim, którzy wykazują klasyczne objawy, niezależnie od wyników RT-PCR.

Biuletyn Informacyjny| Kliknij, aby uzyskać najlepsze objaśnienia dnia w swojej skrzynce odbiorczej



Dlaczego fałszywe negatywy

Testy RT-PCR, uważane za złoty standard w diagnostyce Covid-19, nie mają być doskonałe. Minimalna czułość (zdolność do wykrywania wyników pozytywnych) wymagana przez Indyjską Radę Badań Medycznych (ICMR) do walidacji testu RT-PCR wynosi 95%. Oznacza to, że oczekuje się do 5% wyników fałszywie ujemnych.



Chociaż doniesienia anegdotyczne sugerują, że odsetek wyników fałszywie negatywnych rośnie w Indiach, nie ma jeszcze badań, które by to potwierdzały.

Teoretycznie cztery szerokie czynniki określają dokładność testu RT-PCR: miano wirusa u osoby, jakość pobierania i przetwarzania próbek, skuteczność samego zestawu testowego, a także punkt odniesienia dla interpretacji testu.



OBCIĄŻENIE WIRUSOWE: Zazwyczaj Covid-19 objawia się odpowiednio do piątego dnia cyklu infekcji. Testowany wcześniej po ekspozycji, osoba zarażona może okazać się ujemna w stosunku do Covid. Może to nie być głównym czynnikiem stojącym za niedawnym fałszywie negatywnym trendem, ponieważ niektóre mutanty Covid-19 najwyraźniej wykazują wczesne objawy.

U wielu objawowych pacjentów, którzy uzyskali wynik fałszywie ujemny w testach RT-PCR, potwierdzono następnie dodatni wynik Covid w teście płukania oskrzelowo-pęcherzykowego (BAL), który pobiera próbki z dolnych dróg oddechowych przez bronchoskop. Doprowadziło to do przypuszczeń, że niektóre mutanty omijają górne drogi oddechowe, aby dotrzeć do płuc — scenariusz, który może zaprzeczyć testowi RT-PCR, opartemu na próbce pobranej z jamy nosowej i gardła, obciążeniu wirusem wymaganym do uzyskania dokładnego wyniku.



WYBUCH POJEMNOŚCIOWY: Liczba laboratoriów testowych Covid w Indiach wzrosła z 14 w lutym 2020 r. do ponad 2400 w kwietniu 2021 r. Tak szybka ekspansja wymagała zatwierdzenia setek laboratoriów do testowania RT-PCR i przeszkolenia tysięcy techników w pośpiechu.

Jako zabezpieczenie, ICMR w lipcu 2020 r. wymienił 30 laboratoriów kontroli jakości do sprawdzenia wszystkich zatwierdzonych przez siebie laboratoriów Covid. Od tego czasu dodano kolejne 8 laboratoriów kontroli jakości. Jednak źródła z wielu laboratoriów w trzech stanach podają, że przeprowadzono tylko kilka inspekcji obiektów i instrumentów.



Idealnie, mieszanka próbek pozytywnych i negatywnych powinna być pobierana losowo z każdego laboratorium okresowo do ponownego badania. Czy to kiedykolwiek zostało zrobione? Tak. Czy robiono to konsekwentnie? Nie, powiedział naukowiec z instytutu ICMR, który nie jest upoważniony do rozmów z mediami.

Podejście do okresowego monitorowania laboratoriów i danych dotyczących zgodności z jakością od lipca 2020 r., ICMR i wiele laboratoriów kontroli jakości milczyło.



ELEMENT LUDZKI: Testy mogą się nie udać na różnych etapach — od złego pobierania i przechowywania próbek po wadliwą ekstrakcję i amplifikację. Wszystkie zestawy RT-PCR zawierają kontrolę wewnętrzną (IC) chroniącą przed scenariuszem, w którym żadne RNA nie jest ekstrahowane/amplifikowane, co prowadzi do wyniku fałszywie ujemnego. IC może być egzogenny lub endogenny. Jest egzogenny, gdy sztuczna cząsteczka matrycy RNA jest dodawana do każdej próbki przed ekstrakcją RNA. Test uznaje się za nieważny, jeśli po ekstrakcji nie wykryto syntetycznego RNA i zalecono powtórny test. A kontrola endogenna wykorzystuje ludzki gen „gospodarstwa domowego” obecny w próbce; jego niewykrycie po procedurze ekstrakcji RNA unieważnia test.

Ludzki gen odpowiedzialny za utrzymanie porządku zapewnia również jakość próbki… Ale ponad 75% zestawów RT-PCR na rynku indyjskim wykorzystuje tańsze egzogenne kontrole wewnętrzne, powiedział biolog molekularny z Bombaju.

W SOP z kwietnia 2020 r. ICMR dotyczącym RT-PCR stwierdzono, że egzogenną kontrolę ekstrakcji można zignorować, ponieważ nie odzwierciedla ona jakości pobranej próbki. Zaleca się, aby osobna RNaza P lub jakikolwiek inny ludzki gen odpowiedzialny za utrzymanie komórek… była prowadzona równolegle w oddzielnej probówce… (aby) sprawdzić zarówno jakość pobranej próbki, jak i procedurę ekstrakcji.

W maju 2020 megaprzetarg ogłoszony przez ICMR/HLL na zestawy RT-PCR określił podobne wymagania. Wielu producentów twierdziło, że różne firmy stosują różne kontrole wewnętrzne, w tym te egzogenne, które zostały zatwierdzone przez agencje regulacyjne, takie jak FDA i CEIVD, oraz że niekorzystna selekcja oparta na genach „gospodarstwa domowego” zniechęcałaby do uczciwej konkurencji. Ostatecznie przetarg został zrewidowany tak, aby zawierał zarówno endogenne, jak i egzogeniczne opcje kontroli wewnętrznej.

MUTACJA WIRUSOWA: Test RTR-PCR celuje w określone obszary jednego lub więcej genów wirusowych w celu wykrycia jego obecności. Test może dać wyniki fałszywie ujemne, jeśli w ocenianym segmencie genomu wystąpi mutacja. Testy wykorzystujące wiele celów genetycznych, takie jak te stosowane w Indiach, są mniej podatne na zmylenie przez mutacje.

Organy regulacyjne, takie jak amerykańska FDA, rutynowo monitorują wpływ mutacji na testy RT-PCR Podczas gdy eksperci, tacy jak dr Rakesh Mishra, dyrektor Centrum Biologii Komórkowej i Molekularnej w Hyderabad (CCMB), uważają, że ICMR powinien zainicjować podobne ćwiczenie, może to nie być łatwe do monitorowania w czasie rzeczywistym ponad 200 zestawów RT-PCR zatwierdzonych w Indiach przeciwko pojawiającym się mutacjom.

Po pierwsze, żaden producent nie podał (ani nie będzie) upubliczniał szczegółowych sekwencji docelowych testów. Zgłaszając się do walidacji do ICMR, wymieniają tylko docelowe geny, a nie sekwencję startera, powiedział starszy badacz z Ministerstwa Zdrowia.

Do tej pory istnieje jednak podstawa, aby czuć się dość pewnie, nawet przy braku jakiejkolwiek kontroli skuteczności w czasie rzeczywistym. Jak dotąd warianty Covid-19 mają głównie mutacje w genie S (białko kolce). Większość zestawów używa tutaj zachowanych (niezmienionych) obszarów docelowych, powiedziała dr Shanta Dutta, dyrektor Narodowego Instytutu Cholery i Chorób Jelitowych (NICED) w Kalkucie.

Awaria cen

W ciągu jednego roku cena zestawu RT-PCR spadła z ponad 1100 rupii do mniej niż 40 rupii. Ponieważ zwolnienie z cła importowego zostało wycofane w październiku 2020 r., większość zagranicznych marek opuściła rynek indyjski ze względu na dodatkowe 15% obciążenie kosztami. Wiele indyjskich marek również odmówiło sprzedaży poniżej 100 rupii. Wiele z nich znalazło oddanych klientów korporacyjnych, którzy nie mają nic przeciwko dopłacie, aby zapewnić jakość. Niektórzy oferują nawet wiele zestawów do PCR na różnych poziomach cenowych.

Chociaż nikt tego nie mówi w dokumentacji, wielu kwestionuje jakość tańszej konkurencji. Przeciwieństwem jest to, że każdy zestaw testowy dostępny na rynku spełnia kryteria walidacyjne ICMR i że każda wojna cenowa ostatecznie przynosi korzyści konsumentowi.

Jednak nie wszyscy są przekonani. Odpowiedni spadek kosztów testu laboratoryjnego wynosi od 4500 do 800 rupii. Poza tym, czy ktoś odwiedzający jej lokalne laboratorium w celu wykonania testu na Covid wie, który zestaw jest używany? Ile laboratoriów wyda 100 rupii, skoro mogą uciec z użyciem zestawu rupii 40? powiedział jeden z pierwszych indyjskich producentów zestawów Covid PCR.

DOŁĄCZ TERAZ :Ekspresowy kanał telegramu z wyjaśnieniem

ten Wartość Ct

Test RT-PCR wzmacnia kwas nukleinowy wyekstrahowany z próbki w celu wykrycia tego specyficznego dla wirusa Covid-19. Wzmocnienie zachodzi w cyklach z wartością progową (Ct). Oczywiście, im wyższa obecność/miano wirusa, tym niższa wartość Ct lub liczba cykli amplifikacji wymaganych do uczynienia go wykrywalnym.

ICMR ustawił wartość Ct na 35 dla wyników ujemnych. Poza tym wszelkie ślady potencjalnie obecnego wirusa są uważane za nieistotne, a próbka jest uznawana za negatywną wobec Covid.

Jednak niektóre stany, takie jak Maharashtra, próbowały rozszerzyć granicę dopuszczalności, sugerując wartość Ct wynoszącą 24. Ponieważ wykluczałoby to potencjalnie dużą liczbę osób z ilościowo niższym, ale klinicznie istotnym wiremią, ICMR potwierdził swoje stanowisko w sprawie wartości Ct wynoszącej 35 .

Jednak nie jest jasne, czy wszystkie stany stosują ten sam wzorzec Ct. Według dyrektorów wyższego szczebla co najmniej dwóch wielostanowych sieci laboratoryjnych, otrzymali oni sprzeczne, a czasem nieuzasadnione instrukcje ustne dotyczące takich parametrów testowych. Nawet test molekularny nie jest odporny na subiektywne nastawienie.

Podziel Się Z Przyjaciółmi: